摘要：為了研究大理紫烏頭的二萜生物堿成分，采用硅膠柱層析進(jìn)行化合物的分離純化，通過NMR方法對其化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明大理紫烏頭含6個(gè)二萜生物堿成分，包括5個(gè)C19�矠躅^堿型：塔拉薩敏(1)、14�惨阴Ｋ�拉薩敏(2)、黃草烏堿丙(3)、8�踩ヒ阴５釣鯄A(4)、印烏堿(5)和1個(gè)C20�埠Ｌ娑ㄐ蛯挒鯇�(6)。其中化合物3～6為首次從該物種分離得到。

　　關(guān)鍵詞：大理紫烏頭;毛茛科;烏頭屬;二萜生物堿

　　紫烏頭(AconitumepiscopaleLevl.)系毛茛科(Ranunculaceae)烏頭屬(Aconitum)多年生草本植物，主要分布于我國云南西北部及四川西南部，生于海拔2400～3200米山地[1]。紫烏頭也是云南、四川彝族、納西族等多個(gè)民族的習(xí)用藥材，彝醫(yī)稱之為“堵喇”，其塊根用于解草烏、鴉片等中毒，療效確切，是極具特色的民族藥。

　　20世紀(jì)50年代朱仁宏等首先開展紫烏頭的化學(xué)成分研究，目前國內(nèi)多個(gè)研究小組已從紫烏頭中分離鑒定30多個(gè)二萜生物堿成分[2～4]。已有的文獻(xiàn)研究表明不同產(chǎn)地紫烏頭的化學(xué)成分差異較大。為更好地開發(fā)我國這一特有的藥用草烏資源，本文對大理產(chǎn)的紫烏頭進(jìn)行了化學(xué)成分研究，從中分離鑒定6個(gè)二萜生物堿，包括5個(gè)C19�矠躅^堿型：塔拉薩敏(1)、14�惨阴Ｋ�拉薩敏(2)、黃草烏堿丙(3)、8�踩ヒ阴５釣鯄A(4)、印烏堿(5)、和1個(gè)C20�埠Ｌ娑ㄐ蛯挒鯇�(6)。其中化合物3～6為首次從該種分離得到。

　　1實(shí)驗(yàn)部分

　　1.1儀器、試劑和材料

　　1.1.1儀器BrukerDRX��600型(Bruker，Karlsruhe，德國)核磁共振儀;亞榮旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮RE��3000);DLSB��5L/25低溫冷卻液循環(huán)泵(鞏義市予華儀器有限公司);FA1004型上皿電子天平(上海天平儀器廠)。1.1.2試劑自行配制的改良碘化鉍鉀試劑;CDCl3[99.9%atom%D，contains0.03%(V/V)TMS](Sigma公司，上海);二氯甲烷、甲醇、石油醚、丙酮、二乙胺、氨水(天津化學(xué)試劑有限公司);柱層析硅膠(100～200目和300～400目)和G型薄層層析硅膠板(青島海洋化工廠)。

　　1.1.3材料

　　原藥材于2018年7月采集于云南省大理白族自治州大理市，經(jīng)中國科學(xué)院昆明植物研究所邱明華研究員鑒定為紫烏頭(AconitumepiscopaleLevl.)的根。標(biāo)本保存于云南農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院(2018�瞐c��1)。

　　1.2提取分離

　　1.2.1提取

　　大理紫烏頭塊根(3.5kg)經(jīng)陰干粉碎后采用0.1M鹽酸(15L)進(jìn)行滲漉。滲漉液用25%氨水堿化至pH9，乙酸乙酯萃取(3×10L)。合并乙酸乙酯層，減壓濃縮得深褐色總生物堿浸膏10.4g。

　　1.2.2分離

　　將總生物堿浸膏溶于有機(jī)溶劑，采用硅膠進(jìn)行拌樣，經(jīng)硅膠柱層析(二氯甲烷∶甲醇100∶1→1∶1)梯度洗脫，TLC檢測合并相同組分得7部分(FrA�睩rG)。其中FrA(3.0g)經(jīng)硅膠柱層析(石油醚∶丙酮∶二乙胺100∶1∶1)得化合物1(200mg)和化合物3(8mg)。FrB(0.2g)經(jīng)硅膠柱層析(石油醚∶二乙胺100∶2)得化合物2(33mg)。FrC(0.5g)經(jīng)硅膠柱層析(石油醚∶丙酮∶二乙胺100∶4∶1→80∶20∶1)得到化合物5(30mg)。FrD(2.0g)經(jīng)硅膠柱層析(石油醚∶丙酮∶二乙胺80∶20∶1→75∶25∶1)得化合物4(40mg)、和6(20mg)。

　　2結(jié)構(gòu)鑒定

　　化合物1：白色粉末，分子式C24H39NO5。1HNMR(CDCl3，600MHz)δH：4.66(s，1H，OH��14)，4.00(m，1H，H��14)，3.03，2.89(ABq，J=9.0Hz，each1H，H��18)，3.21，3.16，3.12(s，each3H，3×OCH3)，0.93(t，J=7.2Hz，3H，NCH2CH3);13CNMR(125MHz，CDCl3)δC：86.1(d，C��1)，25.7(t，C��2)，32.6(t，C��3)，38.5(s，C��4)，45.9(d，C��5)，24.7(t，C��6)，45.7(d，C��7)，72.7(s，C��8)，46.8(d，C��9)，45.8(d，C��10)，48.6(s，C��11)，27.7(t，C��12)，37.6(d，C��13)，75.4(d，C��14)，38.5(d，C��15)，82.2(d，C��16)，62.7(d，C��17)，79.4(t，C��18)，53.1(t，C��19)，49.3(t，C��21)，13.6(q，C��22)，56.1(q，OCH3��1)，56.3(q，OCH3��6)，59.3(q，OCH3��18)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致，鑒定其為塔拉薩敏(talatisamine)[5]。

　　化合物2：白色粉末，分子式C26H41NO6。1HNMR(CDCl3，600MHz)δH：4.80(t，J=4.8Hz，1H，H��14)，3.62(d，J=6.4Hz，1H，H��6)，3.28，3.26，3.21(s，each3H，3×OCH3)，1.05(t，J=7.2Hz，3H，NCH2CH3);13CNMR(125MHz，CDCl3)δC：85.9(d，C��1)，26.4(t，C��2)，32.9(t，C��3)，38.7(s，C��4)，46.2(d，C��5)，25.1(t，C��6)，45.6(d，C��7)，73.8(s，C��8)，46.4(d，C��9)，45.1(d，C��10)，48.9(s，C��11)，28.6(t，C��12)，41.1(d，C��13)，75.4(d，C��14)，35.6(d，C��15)，81.9(d，C��16)，62.4(d，C��17)，79.7(t，C��18)，53.3(t，C��19)，49.5(t，C��21)，13.8(q，C��22)，56.3(q，OCH3��1)，56.4(q，OCH3��6)，59.6(q，OCH3��18)，170.9(s，OAc��14)，21.5(q，OAc��14)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致，鑒定其為14�惨阴Ｋ�拉薩敏(14�瞐cetyltala�瞭isamine)[6]。

　　化合物3：白色粉末，分子式C35H49NO9。1HNMR(CDCl3，600MHz)δH：8.00(d，J=8.8Hz，2H，H��2′/6′)，6.90(d，J=8.8Hz，1H，H��3′/5′)，5.03(t，J=4.8Hz，1H，H��14)，4.04(d，J=6.4Hz，H��6)，3.85(s，3H，OCH3��4′)，3.37，3.28，3.26，3.17(s，each3H，4×OCH3)，1.38(s，3H，OAc��8)，1.08(t，J=7.2Hz，3H，NCH2CH3);13CNMR(125MHz，CDCl3)δC：85.2(d，C��1)，26.6(t，C��2)，35.0(t，C��3)，39.2(s，C��4)，49.3(d，C��5)，83.0(d，C��6)，45.1(d，C��7)，86.0(s，C��8)，46.4(d，C��9)，44.1(d，C��10)，50.5(s，C��11)，29.1(t，C��12)，39.3(d，C��13)，75.5(d，C��14)，38.0(t，C��15)，83.6(d，C��16)，61.8(d，C��17)，80.6(t，C��18)，53.9(t，C��19)，49.2(t，C��21)，13.6(q，C��22)，56.7(q，OCH3��1)，57.9(q，OCH3��6)，56.2(q，OCH3��16)，59.3(q，OCH3��18)，169.9(s，OAc��8)，21.9(q，OAc��8)，166.4(s，OCO��14)，123.1(s，C��1′)，131.9(d，C��2′，C��6′)，113.9(d，C��3′，C��5′)，163.4(s，C��4′)，55.6(q，OCH3��4′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致，鑒定其為黃草烏堿丙(vilmorrianineC)[7]。

　　化合物4：淡黃色粉末，分子式C33H47NO10，1HNMR(CDCl3，600MHz)δH：7.96(d，J=8.8Hz，2H，H��2′/6′)，6.90(d，J=8.8Hz，1H，H��3′/5′)，5.11(d，J=5.0Hz，1H，H��14)，4.08(d，J=6.8Hz，1H，H��6)，3.84(s，3H，OCH3��4′)，3.71，3.66(ABq，J=8.8Hz，each1H，H��18)，3.23，3.27，3.29，3.39(s，each3H，4×OCH3)，1.09(t，J=7.2Hz，3H，NCH2CH3);13CNMR(125MHz，CDCl3)δC：83.3(d，C��1)，33.8(t，C��2)，72.1(d，C��3)，43.5(s，C��4)，48.2(d，C��5)，82.6(d，C��6)，50.4(d，C��7)，74.0(s，C��8)，48.0(d，C��9)，42.2(d，C��10)，53.5(s，C��11)，36.1(t，C��12)，76.1(d，C��13)，80.1(d，C��14)，42.3(t，C��15)，82.8(d，C��16)，62.0(d，C��17)，77.5(t，C��18)，49.1(t，C��19)，47.6(d，C��21)，13.7(q，C��22)，56.1(q，OCH3��1)，58.5(q，OCH3��6)，57.7(q，OCH3��16)，59.3(q，OCH3��18)，166.6(s，OCO��14)，122.5(s，C��1′)，131.9(d，C��2′，C��6′)，113.9(d，C��3′，C��5′)，163.7(s，C��4′)，55.6(q，OCH3��4′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致，鑒定其為8�踩ヒ阴５釣鯄A(8�瞕eacetylyunaconitine)[8]。

　　化合物5：白色粉末，分子式C34H47NO10，1HNMR(CDCl3，600MHz)δH：8.04(d，J=7.4Hz，2H，H��2′/6′)，7.53(t，J=7.4Hz，1H，H��4′)，7.43(t，J=7.4Hz，2H，H��3′/5′)，4.88(d，J=5.2Hz，1H，H��14)，4.00(d，J=6.4Hz，1H，H��6)，3.61，3.22(ABq，J=9.2Hz，each1H，H��18)，3.13，3.24，3.27，3.51(s，each3H，4×OCH3)，1.27(s，3H，OAc��8)，1.08(t，J=7.2Hz，3H，NCH2CH3);13CNMR(125MHz，CDCl3)δC：83.6(d，C��1)，33.7(t，C��2)，71.7(t，C��3)，43.3(s，C��4)，48.9(d，C��5)，82.4(d，C��6)，44.8(d，C��7)，85.7(s，C��8)，47.5(d，C��9)，41.0(d，C��10)，50.4(s，C��11)，35.3(t，C��12)，74.9(d，C��13)，78.9(d，C��14)，39.7(t，C��15)，83.3(d，C��16)，61.8(d，C��17)，77.0(t，C��18)，48.9(t，C��19)，47.6(t，C��21)，13.4(q，C��22)，56.0(q，OCH3��1)，58.9(q，OCH3��6)，57.9(q，OCH3��16)，59.3(q，OCH3��18)，169.9(s，OAc��8)，21.6(q，OAc��8)，166.4(s，OCO��14)，130.3(s，C��1′)，129.8(d，C��2′，C��6′)，128.7(d，C��3′，C��5′)，133.2(d，C��4′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致，鑒定其為印烏堿(indaconitine)[9，10]。

　　化合物6：白色粉末，分子式C23H29NO5，1HNMR(600MHz，CDCl3)δH：2.37(s，3H，NCH3)，2.03(s，3H，OAc��2)，1.41(s，3H，CH3��18)，5.30，5.20(s，each1H，H��17)，5.11(m，H��2)，4.32(s，1H，H��15);13CNMR(125MHz，CDCl3)δC：35.7(t，C��1)，68.5(d，C��2)，43.6(t，C��3)，37.0(s，C��4)，59.4(d，C��5)，203.6(s，C��6)，48.9(d，C��7)，44.4(s，C��8)，47.6(d，C��9)，47.0(t，C��10)，21.9(t，C��11)，57.9(d，C��12)，210.8(s，C��13)，52.4(d，C��14)，71.3(d，C��15)，147.6(s，C��16)，113.7(d，C��17)，31.2(q，C��18)，61.0(t，C��19)，70.9(d，C��20)，43.7(q，NCH3)，173.0(s，OAc��2)，21.9(q，OAc��2)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致，鑒定其為寬烏寧(sczukininc)[11]。

　　3結(jié)論

　　本文從大理紫烏頭中分離鑒定了6個(gè)生物堿：塔拉薩敏(1)、14�惨阴Ｋ�拉薩敏(2)、黃草烏堿丙(3)、8�踩ヒ阴５釣鯄A(4)、印烏堿(5)和C20�埠Ｌ娑ㄐ蛯挒鯇�(6)。其中化合物3～6為首次從該種分離得到。本文不僅進(jìn)一步完善了大理紫烏頭的二萜生物堿成分，還有為紫烏頭的二萜生物堿成分的完善提供理論支持，同時(shí)，也為更好地開發(fā)我國這一特有的藥用草烏資源提供理論支撐。

　　參考文獻(xiàn)：

　　[1]王文采，中國植物志(27卷)[M].北京：科學(xué)出版社，1979，228.

　　[2]丁立生，吳鳳鍔，陳耀祖.紫烏頭中的二萜生物堿研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1991，3(4)：19��23.

　　[3]李詠梅，龔元，姜艷萍，等.紫烏頭中二萜生物堿的研究[J].中草藥，2013，44(8)：951��965.

　　[4]龔元，李詠梅，趙靜峰，等.麗江紫烏頭中的二萜生物堿[J].云南大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2012，34(5)：566��569.

　　[5]BoidoV，EdwardsOE，HandaKL，etal.AlkaloidsofAco�瞡itumcolumbianumNutt.[J].CanJChem，1984，62(4)：778��784.

　　醫(yī)藥論文投稿刊物：《中草藥雜志》主要報(bào)道中草藥化學(xué)成分;藥劑工藝、生藥炮制、產(chǎn)品質(zhì)量、檢驗(yàn)方法;藥理實(shí)驗(yàn)和臨床觀察;藥用動(dòng)、植物的飼養(yǎng)、栽培、藥材資源調(diào)查等方面的研究論文，并辟有中藥現(xiàn)代化論壇、專論、綜述、短文、新產(chǎn)品、企業(yè)介紹、學(xué)術(shù)動(dòng)態(tài)和信息等欄目。