農藥已經成為了中草藥中主要的外源性有害殘留物之一，帶來的潛在安全問題影響了中藥行業的持續發展。因此，加強中藥中農藥多殘留的分析新技術研究對保證其質量安全是非常必要的。本文將綜述各種分析方法在中藥材農殘分析中的應用現狀，對目前各種技術的關鍵步驟進行總結、介紹和比較。

　　隨著農藥殘留分析領域樣品前處理方法的逐漸成熟，農藥殘留的檢測方法也多種多樣，目前較常用的方法主要為氣相色譜法、氣相色譜-質譜聯用技術、高效液相色譜法、液相色譜-質譜聯用技術、毛細管電泳法、免疫分析法和生物傳感器技術等。

　　一、氣相色譜法

　　氣相色譜法(GC)是一種以氣體為流動相的一種色譜分離分析方法。在中藥農殘的分析中，氣相色譜法常與火焰離子化檢測器[1]、火焰光度檢測器(FPD)[2-3]、電子捕獲檢測器(ECD)[3-4]和質譜檢測器(MS)[3]聯用。Du J J等[1]將超聲波輔助提取與分散液液微萃取技術聯合用于樣品提取，采用氣相色譜-火焰離子化檢測器進行樣品分析，建立了梨汁中氯氰菊酯、芐氯菊酯殘留的分析方法。鐘瑤等人[2]利用乙酸乙酯超聲輔助提取、石墨化炭黑凈化，GC-FPD法測定濕毒清片中的14種有機磷。

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　　2020年中華人民共和國藥典(四部)[3]中農藥殘留測定方法中，針對不同類型的農藥共有五種檢測方法，五種檢測方法的共同缺陷均為所用到的試劑毒性較大且消耗較多，需要反復提取、凈化和濃縮;如第一法中采用二氯甲烷-丙酮-石油醚反復提取和凈化，旋轉蒸發兩次濃縮，結合GC-ECD方法測定植物性藥材和飲片9 種有機氯類農藥，該方法的樣品前處理較復雜，且用到毒性較大的二氯甲烷，試劑消耗較多，但方法的靈敏度可以達到0.001mg/kg。葉江雷等人[4]采用分散固相萃取提取凈化、GC-ECD 測定個茶葉中六六六、敵敵涕、硫丹等茶葉中常見的20種農藥殘留量，該方法的樣品提取無需濃縮，凈化液過膜后直接分析，可以在很大程度上節約處理時間，有一定的基質干擾。

　　二、高效液相色譜法

　　高效液相色譜法在中藥制劑中農藥多殘留的分析中占了非常重要的地位，常利用強大的色譜分離技術，與二極管陣列檢測器(DAD)[5]、熒光檢測器(FLD)[6]、質譜檢測器(MS)[7]等聯用。高效液相色譜法(HPLC)是一種以高壓輸出的液體為流動相的色譜技術，具有高速、高效、高靈敏及自動化等特點。藏利國[5]采用正己烷和丙酮混合溶劑提取銀杏葉中的氯氰菊醋農藥殘留，氟羅里硅土/活性炭柱凈化，LC-DAD分析。吳定芳等人[6]乙腈提取，SPE-NH2固相萃取小柱凈化，柱后衍生，LC-FLD法分析19種氨基甲酸酯類農藥。Jiachun Li等人[7]用高效液相色譜串聯質譜法測定三七止痛膠囊中的35種有機磷農藥，采用分散固相萃取法凈化。

　　三、 高效毛細管電泳法

　　高效毛細管電泳法(HPCE)是電泳與色譜相結合的一種現代色譜分離技術，原理是以毛細管為分離通道，高壓直流電場為驅動力，依據樣品中的各種待測組分之間的淌度和分配行為上的差異而進行分離的微型液相分離技術。在中藥農殘中，通常會借助毛細管電泳法的分離技術與紫外檢測器(UV)、電導檢測器(ECD)與質譜檢測器(MS)[8-9]聯用。杜雪純等人[8]采用毛細管電泳質譜聯用技術，通過對緩沖溶液組成和質譜條件的優化，實現了多菌靈、多效唑等 19 種有機氮類農藥的有效分離，最后成功地測定了白芍樣品中 19 種有機農藥殘留。劉銀[9]采用環糊精毛細管區帶電泳法測定滅草唆、甲氧咪草煙、稀草酮和噸喘草銅對映體，該方法所需樣品用量少、運行成本低、抗污染能力強等優點。

　　四、超臨界流體色譜法

　　超臨界流體色譜(SFC)是以超臨界流體作為流動相的色譜技術，其分離原理與 GC、LC 相似，根據樣品組分在流動相和固定相間的分配系數不同而實現分離。因為超臨界流體具備高擴散性、低粘度、溶解能力強等特點，使得超臨界流體色譜的分離效能優于 GC、LC、SFC 在農殘分析中與各種氣相和液相色譜檢測器以及與質譜聯用，主要用于熱不穩定、低揮發性以及難以用氣相和液相色譜分離分析的農藥品種。Ishibashi M 等人以超臨界流體色譜串聯質譜法為色譜分析手段，建立了糙米、洋蔥和菠菜中 17 種農藥殘留的分析方法。

　　五、免疫分析法

　　免疫分析法(IA)是利用抗體可與抗原發生特異性結合的這一特殊性質，將抗體作為生物化學檢測器對目標化合物進行定量和定性分析的一種技術。目前，用于農藥分析的免疫分析方法主要是酶免疫分析法，其中酶聯免疫吸附分析法(ELISA)應用于農藥殘留檢測的報道較多，楊熠等人[12]采用聚乙二醇-6000制備抗恩諾沙星卵黃抗體，間接競爭酶聯免疫吸附法檢測恩諾沙星。

　　六、 生物傳感器法

　　生物傳感器是用生物活性物質(如酶、抗原)作為識別元件，對待測化合物具有高度選擇性的一種儀器分析新技術。與其他分析方法相比，生物傳感器具有不需要樣品前處理、特異性強、分析快速、操作簡單、價廉等特點。魏福祥等人采用乙酰膽堿酯酶生物傳感器方法測定蔬菜水果中對馬拉硫磷和甲基對硫磷，該方法與氣相色譜和液相色譜法進行了對比，耗時較少，操作簡單。

　　各種分析方法在中藥農藥殘留的對比

　　氣相色譜方法

　　氣相色譜方法是中藥農殘中最常用的一種檢測方法，根據檢測器的不同可以特異性的檢測不同的對象、適用范圍廣、靈敏準確;但該種方法的樣品前處理一般較復雜、試劑消耗多、儀器較昂貴，不適用揮發性低的農殘的測定。

　　高效液相色譜法

　　高效液相色譜法在中藥農殘的應用僅次于氣相色譜法，適用于沸點高和對熱穩定性差的農藥，該種方法可以同時檢測526種農藥殘留物，可以準確定性和定量;但該種方法的樣品前處理法跟氣相色譜法一樣，同樣操作復雜、試劑消耗較多。

　　(三)其它四種分析方法

　　高效毛細管電泳法、超臨界流體色譜法、免疫分析法和生物傳感器法目前在中藥農殘的應用不如上述兩種方法廣泛，但這些方法具有所需樣品用量少、運行成本低、耗時少、操作簡單等優點。

　　參考文獻：

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　　gas chromatography [J]. Talanta，2010，82(2)：698-703.

　　[2]鐘瑤，毛雪金，汪玢，等. 超聲波輔助提取-氣相色譜法同時測定濕毒清片中14種有機磷農藥殘留[J]. 分析科學學報，2014，30(1)：87-90.

　　[3]中華人民共和國藥典一部[S]. 2020.

　　[4]葉江雷，金貴娥，莊婉娥，等. 分散固相萃取凈化茶葉中 20 種農藥殘留量的 GC-μECD 測定[J]. 分析實驗室，2011，30(10)：115-119.

　　[5] 臧利國. 氣相色譜、高效液相色譜測定農藥殘留的研究與應用[D]. 山東師范大學，2004.

　　[6]吳定芳，王磊，何茫茫，等. 高效液相色譜法測定蔬菜中19種氨基甲酸酯類農藥的殘留量[J]. 理化檢驗-化學分冊，2020，56(2)：142-147.

　　[7] Jiachun L，Dongpo Let al. Jingling W. Simultaneous determination of 35 ultra‐trace levelpesticide residues in Sanjie Zhentong capsules of traditional Chinese medicine using ultra high performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry[J].Journal of Separation Science，2017，40(4)：999-1009

　　[8] 杜雪純，徐毅敏，季申，等. 白芍中19種農藥殘留的毛細管電泳-質譜聯用檢測方法[J]. 浙江大學學報(醫學版)，2012，41(1)：25-31.

　　[9] 劉銀. 白芍中農殘的色譜質譜檢測及手性農藥的毛細管電泳分離方法研究[D]. 浙江大學，2012.

　　作者：鐘艷琴，蘇望寧，伍鳳祥