摘 要：對(duì)2019年杭州地區(qū)水稻惡苗病暴發(fā)流行的原因進(jìn)行了分析‍‌‍‍‌‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‍‍‌‍‌‍‌‍‌‍‍‌‍‍‍‍‍‍‍‍‍‌‍‍‌‍‍‌‍‌‍‌‍。 結(jié)果表明，稻種帶菌率高和對(duì)氰烯菌酯產(chǎn)生抗藥性是導(dǎo)致其大發(fā)生的主要原因‍‌‍‍‌‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‍‍‌‍‌‍‌‍‌‍‍‌‍‍‍‍‍‍‍‍‍‌‍‍‌‍‍‌‍‌‍‌‍。 進(jìn)一步田間試驗(yàn)表明，4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400倍液和600倍液、25%咪鮮胺乳油2 000倍液、5%咪鮮胺乳油2 000倍液加25%氰烯菌酯懸浮劑2 000倍混配液浸種48 h對(duì)惡苗病的防效較好，顯著優(yōu)于25%氰烯菌酯懸浮劑750倍液和2 000倍液，適合在老(重)病區(qū)和對(duì)氰烯菌酯抗性較高的地區(qū)輪換使用來(lái)控制惡苗病的發(fā)生為害‍‌‍‍‌‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‍‍‌‍‌‍‌‍‌‍‍‌‍‍‍‍‍‍‍‍‍‌‍‍‌‍‍‌‍‌‍‌‍。

　　關(guān)鍵詞：水稻; 惡苗病; 氰烯菌酯; 抗藥性; 防效

　　水稻惡苗病是危害水稻地上部分，主要由種子傳播的一種常見(jiàn)的真菌性病害，引起該病的病原菌為藤倉(cāng)鐮刀菌[1-3]。 近年來(lái)，隨著浙江省水稻集中育秧的推廣，水稻惡苗病的發(fā)生日趨加重，嚴(yán)重威脅早稻的安全生產(chǎn)[4]。 當(dāng)前防治水稻惡苗病的主要措施是采用化學(xué)藥劑對(duì)種子進(jìn)行消毒處理，25%氰烯菌酯懸浮劑作為防治水稻惡苗病的適宜藥劑在浙江稻區(qū)大量使用，長(zhǎng)期單一使用化學(xué)殺菌劑極易產(chǎn)生抗藥性[5-6]。

　　已有報(bào)道在浙江紹興地區(qū)分離到對(duì)氰烯菌酯高抗的惡苗病菌，田間試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用氰烯菌酯浸種處理對(duì)水稻惡苗病的防效較差[7-8]。 2019年杭州市錢(qián)塘新區(qū)河莊街道早稻用25%氰烯菌酯懸浮劑對(duì)種子進(jìn)行浸種消毒處理，水稻秧苗惡苗病仍大量發(fā)生，發(fā)病率嚴(yán)重的達(dá)到100%，造成大量的經(jīng)濟(jì)損失。 為此我們開(kāi)展了一系列試驗(yàn)，一方面測(cè)定了種子帶菌率和惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗藥性，另一方面從生產(chǎn)實(shí)踐出發(fā)篩選了有效的種子浸種處理藥劑，通過(guò)研究力求科學(xué)防控水稻惡苗病的發(fā)生，保障糧食生產(chǎn)安全。

　　1 材料與方法

　　1.1 試驗(yàn)材料

　　供試水稻品種：中早39號(hào)(浙江勿忘農(nóng)公司); 供試藥劑：96%氰烯菌酯原藥(江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司)、25%氰烯菌酯懸浮劑(江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司)、25%咪鮮胺乳油(江蘇輝豐生物農(nóng)業(yè)股份有限公司)、4.23%甲霜·種菌唑微乳劑(愛(ài)利思達(dá)生物化學(xué)品有限公司)。

　　1.2 種子帶菌率測(cè)定

　　將稻種用無(wú)菌水清洗后，先用70%酒精浸泡1 min，再用3%(有效氯)次氯酸鈉溶液浸泡3 min，最后用無(wú)菌水清洗3遍，將種子在超凈臺(tái)中晾干后接種到加有100 μg/mL鏈霉素和100 μg/mL卡那霉素的馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基平板上，每張平板均勻接種7個(gè)稻種，25℃黑暗培養(yǎng)3 d，觀察稻種表面及周?chē)�的菌落情況。

　　1.3 惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗藥性測(cè)定

　　1.3.1 惡苗病菌分離

　　選取錢(qián)塘新區(qū)水稻育秧基地表現(xiàn)明顯惡苗病癥狀的水稻秧苗，從莖基部剪取約2~3 cm的莖段，用自來(lái)水沖洗干凈，先用70%酒精浸泡消毒1 min，再用3%(有效氯)次氯酸鈉溶液浸泡消毒3 min，無(wú)菌水沖洗3次，超凈臺(tái)中晾干，將莖段切成約5 mm的小塊，接種在含100 μg/mL鏈霉素和100 μg/mL卡那霉素的PDA培養(yǎng)基平板上，25℃黑暗培養(yǎng)5 d后，根據(jù)菌落顏色、形態(tài)判斷為鐮刀菌的菌株轉(zhuǎn)接到新的PDA培養(yǎng)基平板上，25℃黑暗培養(yǎng)，備用。

　　1.3.2 抗藥性測(cè)定

　　采用區(qū)分劑量法測(cè)定惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗藥性。 將氰烯菌酯原藥用丙酮配制成100 000 μg/mL的母液，然后配制成含氰烯菌酯質(zhì)量濃度為0 μg/mL、0.25 μg/mL、1 μg/mL、50 μg/mL和200 μg /mL 的PDA 平板。 將分離菌株用打孔器切成直徑5 mm的菌餅，將菌餅接種至含氰烯菌酯的PDA平板上，每個(gè)平板接種7個(gè)菌餅，每個(gè)菌株每濃度處理重復(fù)3次。 25 ℃培養(yǎng)4 d后觀察菌落生長(zhǎng)情況，具體設(shè)置見(jiàn)圖1。 不能在含0.25 μg/mL氰烯菌酯的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的為敏感菌株; 能在0.25~1 μg/mL氰烯菌酯的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的為低水平抗藥性菌株; 能在1~50 μg/mL氰烯菌酯的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的為中等水平抗藥性菌株; 能在200 μg/mL氰烯菌酯的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的為高水平抗藥性菌株[5]。

　　1.4 藥劑篩選試驗(yàn)

　　試驗(yàn)在杭州市錢(qián)塘新區(qū)河莊鎮(zhèn)進(jìn)行，試驗(yàn)作物為早稻，品種為中早39。 試驗(yàn)設(shè)7個(gè)處理：處理1，清水浸種(CK); 處理2，4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400倍液浸種; 處理3，4. 23%甲霜·種菌唑微乳劑600倍液浸種; 處理4，25%氰烯菌酯懸浮劑2000倍液浸種; 處理5，25%氰烯菌酯懸浮劑750倍液浸種; 處理6，25%咪鮮胺乳油2 000倍液浸種; 處理7，25%咪鮮胺乳油2 000倍液+25%氰烯菌酯懸浮劑2 000 倍混液浸種。

　　2019年4月8日浸種，每個(gè)處理用水量 2 000 mL，用種量1 500 g，各處理按設(shè)計(jì)濃度配制好藥液并充分?jǐn)嚢韬蟮谷敫煞N子，撈去秕粒，浸種48 h后催芽，催芽1 d后播種，每個(gè)處理播9個(gè)秧盤(pán)，每個(gè)秧盤(pán)用種量166 g; 播后4 d擺盤(pán)灌水。 分別于播種后11 d、18 d調(diào)查水稻秧苗惡苗病發(fā)病情況，記錄發(fā)病株數(shù)，并計(jì)算各處理的病株率和防治效果。

　　病株率(%)=病苗數(shù)/調(diào)查總苗數(shù)×100;

　　防治效果(%)=(對(duì)照區(qū)病株率-處理區(qū)病株率)/對(duì)照區(qū)病株率×100。

　　2 結(jié)果與分析

　　2.1 種子帶菌率

　　在供試的66粒稻種中，長(zhǎng)出惡苗病菌的種子52粒，帶菌率為78.79%。

　　2.2 惡苗病菌對(duì)氰烯菌酯的抗藥性

　　共分離得到51株惡苗病菌，其中氰烯菌酯高抗菌株49株，抗藥性頻率為96.08%，為優(yōu)勢(shì)致病菌株; 另2株為氰烯菌酯中高抗菌株，頻率為3.92%; 本次樣品中未檢測(cè)到低抗和中抗菌株，也沒(méi)有檢測(cè)到敏感菌株。

　　2.3 藥劑篩選

　　不同藥劑處理對(duì)水稻惡苗病的防治效果存在顯著差異，25%氰烯菌酯懸浮劑對(duì)水稻惡苗病的防治效果最差，2 000倍液和750倍液處理的水稻秧苗病株率分別為62.01%和38.47%，防治效果僅37.44%和61.10%; 而25%咪鮮胺乳油2 000倍液、25%咪鮮胺乳油2 000倍液+25%氰烯菌酯懸浮劑2 000倍液混配、4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400倍液和600倍液對(duì)水稻惡苗病的防治效果好，播種后18 d的防效均達(dá)到99.00%左右，這3種藥劑浸種處理間差異不顯著，均極顯著高于25%氰烯菌酯懸浮劑2 000倍液和750倍液處理。

　　農(nóng)業(yè)論文投稿期刊：《浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)》系浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院和浙江大學(xué)聯(lián)合主辦的綜合性農(nóng)業(yè)科技刊物，國(guó)內(nèi)統(tǒng)一刊號(hào)：CN 33-1076/S，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)刊號(hào)：ISSN 0528-9017，創(chuàng)刊于1960年，是全國(guó)創(chuàng)辦較早的農(nóng)業(yè)科技刊物之一。

　　3 小結(jié)與討論

　　從供試惡苗病株分離的惡苗病菌已經(jīng)對(duì)氰烯菌酯產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗藥性，而且供試稻種的帶菌率也非常高，是導(dǎo)致該地2019年早稻惡苗病大發(fā)生的主要原因。 因此，應(yīng)該加強(qiáng)稻種帶菌以及惡苗病菌對(duì)主要浸種藥劑抗藥性的早期檢測(cè)與預(yù)警，科學(xué)選用藥劑，從而實(shí)現(xiàn)水稻惡苗病的有效防控。 本試驗(yàn)表明，4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400倍液和600倍液、25%咪鮮胺乳油

　　2 000倍液、5%咪鮮胺乳油2 000倍液+25%氰烯菌酯懸浮劑2000倍液混配液浸種48 h對(duì)惡苗病防效較好，顯著優(yōu)于25%氰烯菌酯懸浮劑750倍液和2 000倍液浸種處理，適合在老(重)病區(qū)和對(duì)氰烯菌酯抗性較高的地區(qū)輪換使用來(lái)控制惡苗病的發(fā)生為害。

　　參考文獻(xiàn)：

　　[1] ZAINUDIN N, RAZAK A A, SALLEH B. Bakanae disease of rice in Malaysia and Indonesia: etiology of the causal agent based on morphological, physiological and pathogenicity characteristics [J]. J Plant Protect Res, 2008, 48(4): 475-485.

　　[2] 李海東，方利民，尤希宇，等. 3種藥劑浸種對(duì)水稻安全性及惡苗病的防治效果[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，58(12)：2 235-2 238.

　　[3] 沈麗麗，陳翠芳，陳芳芳，等. 氰烯菌酯等藥劑防治水稻惡苗病試驗(yàn)[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，57(3)： 382-384.

　　[4] 葉挺云，謝子正，許渭根，等. 2016年浙江省早稻惡苗病發(fā)生特點(diǎn)及防控建議[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，58(3)：449-450.

　　作者：王國(guó)迪1 陳瑞1* 汪彥欣1 趙麗1 張宇2